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每个铜网随机照相2张。同一组、同一眼别的样本分散，使各组样本容量达24张。对视网膜内核层单个毛细血管管腔面积、血管内皮细胞面积进行形态计量，采用正方测试格计数法测量视网膜内核层单个毛细血管管腔面积、血管内皮细胞的面积。
统计学处理：所有数据均用均数±标准差（x±s）表示，采用SPSS for Windows 11.5统计软件处理。资料正态检验，方差齐性检验后，单因素方差分析，两因素方差分析，P＜0.05为统计学差异有显著性。
2结果
2.1直接眼底镜观察 注射rrVEGF164眼低浓度组在注射后1d表现为玻璃体腔轻度混浊，随后逐渐减轻，至3d恢复透明。高浓度组在注射后1d表现玻璃体中度混浊，5～6d后玻璃体腔恢复透明。约10d表现为眼底后极部大血管轻度结节样扩张，周围视网膜轻度水肿，2wk时重度扩张，4wk时有所加重（图1A）。6wk时与4wk时相比无明显变化。 12wk时玻璃体腔出现纤维组织增生，眼底模糊不清。注射PBS眼无玻璃体混浊，低浓度组和注射PBS眼未出现结节样扩张和视网膜水肿。
2.2眼底荧光血管造影 高浓度组注射rrVEGF164眼视网膜中央动脉约11s开始充盈，灌注时间较正常组延长。注射rrVEGF164后10d表现为眼底后极部视网膜动脉局限性高荧光，荧光素从中央区开始消退。2wk时呈结节样扩张，随时间延长而明显，6wk时与4wk时比较无明显加重。未见视网膜前新生血管渗漏征象（图1B）。3mo时玻璃体腔纤维血管样组织增生，眼底观察困难，未行造影检查。
2.3组织学观察 光镜下低浓度组可见视网膜水肿，各个层次厚度无明显变化。未见突破视网膜内界膜的血管内皮细胞。高浓度组10d时轻度视网膜水肿，2wk时视网膜水肿加重，6wk时视网膜内界膜不完整，视网膜前纤维组织样增生，12wk时在眼底周边部玻璃体视网膜纤维血管样组织增生（图2A，B）。透射电镜显示正常大鼠视网膜内核层毛细血管内皮细胞呈扁长形，细胞核较大，突入毛细血管管腔内。胞质稀少，含有高尔基体、线粒体、粗面内质网等超微结构。高浓度组实验眼2wk时表现为视网膜内核层单个毛细血管内皮细胞肥大、管腔面积变窄（图3A），4wk与6wk时血管管腔、细胞面积恢复正常， 但是6wk时血管内皮细胞增生明显（图3B）。12wk血管内皮细胞增生，毛细血管接近闭塞（图3C）。内核层单个视网膜毛细血管管腔面积和单个视网膜毛细血管内皮细胞面积经配伍设计两因素方差分析，注射rrVEGF164眼同一浓度不同时间各组间比较：100mg/L组差异有显著性，单个视网膜毛细血管管腔面积F＝6964.168，P＝0.000。进一步用多个样本均数q检验，4wk与6wk组差异无显著性，P＝0.449，2wk组与4wk组，2wk组与6wk组差异有显著性。单个视网膜毛细血管内皮细胞面积 F＝108.655，P＝0.000。进一步用多个样本均数q检验，4wk组与6wk组比较差异无显著性，P＝0.935，2wk组与4wk组，2wk组与6wk组差异有显著性(表1)。
2.4视网膜电图振荡电位总波幅（SAOPs） 经配伍设计两因素方差分析，同一浓度不同时间各组间比较：100mg/L组差异有显著性，F＝313.324，P＝0.000。进一步用多个样本均数q检验，2wk组与6wk组比较，差异无显著性，P＝0.559。2wk组与4wk组，6wk组与4wk组差异有显著性（表2）。
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3讨论
玻璃体腔注射的量过低，玻璃体腔药物浓度、药物在玻璃体内的弥散受影响。Dureau等[2]研究发现注射量为3μL或者5μL具有丢失量少、可重复性等优点。而Hayashi等[3]的经验是：对200～250g的白化病大鼠注射玻璃体的液体量的原则是最大量不超过玻璃体容积的10%。综合考虑，本实验选择大鼠玻璃体腔内注射rrVEGF164的体积为4μL，前房穿刺可防止注射后眼压升高。高分子量右旋糖苷（2×106）标记的荧光素不会从血管内漏出，背景荧光很低[4]。为了比 | 
